Có 50 người thiệt mạng, bao gồm cả thủ phạm; 53 người khác bị thương trong cuộc tấn công, với nhiều trường hợp cấp cứu tại bệnh viện địa phương.[26] 41 người, trong đó có thủ phạm, được thông báo tử vong tại hiện trường, trong khi 10 người khác được xác nhận qua đời ở bệnh viện.[24][27] Hộp đêm này chỉ cách Trung tâm Y tế Orlando Regional Medical Center 3 ô phố.[28]

Những nạn nhân đã thiệt mạng:[29]